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miRNA 功能研究

        miRNA是一种重要的基因表达调控因子,其调控作用体现在诸多方面,如:一个miRNA可能调控多个靶基因,而一个靶基因也可受多个miRNA调控,由此可能产生一个复杂庞大的调控网络。锐博生物可为您提供miRNA mimics文库及miRNA inhibitor文库,从各种角度研究在这个调控网络中起重要作用的miRNA。

 

 

        miRNA的功能分析与基因相似,过表达和特异性抑制是两种常用且有效的研究方法。

        过表达:将miRNA mimics转染到细胞中,即可实现miRNA的瞬时过表达。而miRNA agomir可以实现较长时间的miRNA过表达效应。一般细胞实验采用miRNA mimics即可。
        特异性抑制:将miRNA inhibitor转染到细胞中,即可实验miRNA 特异性抑制的作用。而miRNA antagomir的化学修饰可以使其稳定性增强,广泛应用于动物实验中。

        miRNA研究通常在细胞内或体内进行,并与细胞表型(如细胞增殖、细胞凋亡、细胞迁移等)和基因表达分析相结合。

        锐博生物凭借着一流的miRNA特色产品及强大的技术优势,能够为您提供值得信赖的miRNA功能分析服务。您只需要告知miRNA名称,并提供待研究的细胞系即可。

        1)miRNA细胞增殖筛选服务

        细胞增殖是生物体的重要生命特征,特别是癌细胞能够接近无限地分裂增殖。EdU检测方法是最新的细胞增殖检测方法,EdU与T碱基在结构上相似,可代替T碱基插入正在复制的细胞中,基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性,通过检测EdU标记便能准确地反映细胞的增殖情况。

        以miR-x、miR-y的研究为例,A549细胞系转染micrON miRNA mimics文库 24h后,用EdU细胞增殖检测方法来筛选特殊功能的miRNA,miR-x具有明显的抑制细胞增殖的作用,而miR-y具有明显的促进细胞增殖作用。


  图1 采用miRNA文库进行高内涵筛选实验,检测出miR-x、miR-y对细胞增殖有显著影响。

  A:整体图片,4X4 B:局部分解图片 C: miR-x具有明显的抑制细胞增殖的作用,而miR-y具有明显的促进细胞增殖作用

        2) miRNA信号通路筛选服务


  图2 miRNA inhibitor文库筛选对NF-kB 报告基因具有特殊影响的miRNA

        micrOFF miRNA inhibitor文库与NF-kB报告基因质粒载体共转A549细胞,48h后检测荧光素酶的活性的变化来研究miRNA inhibitor对NF-kB信号通路的影响。

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